Eaivelly透明八聯(lián)管用戶指南

——適用于熒光定量PCR的高性能實驗耗材

一、產(chǎn)品概述

Eaivelly透明八聯(lián)管（貨號：EA0202-2）是一款專為熒光定量PCR（qPCR）設(shè)計的高精度實驗耗材，采用超薄壁聚丙烯（PP）材質(zhì)，搭配光學(xué)平蓋，兼容Roche480、ABI7500、Bio-Rad CFX96等主流PCR儀器。其核心優(yōu)勢包括：

• 超薄壁設(shè)計：熱傳導(dǎo)效率提升20%，控溫精度達±0.1℃，顯著縮短實驗循環(huán)時間。

• 無菌保障：經(jīng)γ射線輻照滅菌，無DNase/RNase、無熱源、無內(nèi)毒素，避免樣本污染。

• 光學(xué)性能：透明平蓋透光率≥95%，確保熒光信號采集無衰減。

二、技術(shù)參數(shù)

三、操作指南

1. 樣本制備

• 提取DNA/RNA后，使用Nanodrop檢測濃度，確保模板濃度在10-100 ng/μL范圍內(nèi)。

• 避免反復(fù)凍融樣本，建議分裝后-80℃保存。

2. 試劑混合

• 按實驗需求配制PCR反應(yīng)體系（如2×SYBR Green Master Mix、引物、模板DNA），渦旋混勻后離心。

• 引物設(shè)計需避免二聚體形成，建議Tm值相差≤2℃。

3. 加樣與密封

• 使用8道移液器將20 μL反應(yīng)體系均勻分配至八聯(lián)管各孔，避免氣泡產(chǎn)生。

• 輕壓光學(xué)平蓋至貼合，確保密封性。

4. PCR程序設(shè)置

• 預(yù)變性：95℃ 5分鐘

• 循環(huán)階段：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40個循環(huán)）

• 溶解曲線：60℃→95℃，每0.5℃采集一次熒光信號

5. 數(shù)據(jù)分析

• 使用Bio-Rad CFX Manager或Roche LightCycler軟件分析Ct值和熔解曲線。

• 閾值設(shè)定建議為基線標(biāo)準(zhǔn)差的10倍。

四、應(yīng)用場景

• 基因表達分析：如miRNA、lncRNA的定量檢測。

• 病原體檢測：新冠、流感病毒核酸的熒光定量PCR。

• 分子診斷：腫瘤標(biāo)志物（如KRAS、EGFR）突變篩查。

五、質(zhì)量驗證

1. 兼容性測試

• 在Roche480和ABI7500儀器上分別運行標(biāo)準(zhǔn)曲線實驗，Ct值偏差≤0.3。

2. 熱傳導(dǎo)性能

• 與普通八聯(lián)管對比，Eaivelly八聯(lián)管在95℃變性階段升溫速率提升15%（數(shù)據(jù)來源：上海易匯生物實驗室）。

3. 無菌驗證

• 經(jīng)第三方機構(gòu)檢測，無菌率達100%，無DNase/RNase殘留。

六、注意事項

1. 防止污染

• 實驗前使用75%乙醇擦拭操作臺面，避免使用含氯消毒劑。

• 移液器吸頭需使用帶濾芯的型號。

2. 避免交叉污染

• 不同樣本間更換移液器槍頭，禁止重復(fù)使用。

• 光學(xué)平蓋不可重復(fù)使用，每次實驗需更換新管。

3. 儲存條件

• 未開封的八聯(lián)管需避光保存于干燥環(huán)境，避免高溫高濕。

七、常見問題解答

• Q：熒光信號強度偏低如何解決？
  A：檢查光學(xué)平蓋是否貼合緊密，或更換透光率更高的品牌耗材。

• Q：出現(xiàn)非特異性擴增如何優(yōu)化？
  A：提高退火溫度至62-65℃，或調(diào)整引物濃度至0.2-0.4 μM。

八、供應(yīng)商信息

• 公司名稱：上海易匯生物科技有限公司

• 代理政策：支持區(qū)域代理，提供市場推廣資料及試用裝支持。

通過本指南，科研人員可高效利用Eaivelly透明八聯(lián)管開展熒光定量PCR實驗，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和重復(fù)性。如需進一步技術(shù)支持，請聯(lián)系供應(yīng)商獲取定制化解決方案。